020-28906991  
产品分类
  • 细胞
    原代细胞
    干细胞
    永生化细胞
    免疫细胞
    细胞系
  • 耗材
    培养/冻存类
    培养皿
    培养瓶
    培养板
    细胞爬片
    细胞工厂
    冻存管
    冻存盒
    冻存架
    细胞摇瓶
    PCR/电泳类
    384孔板
    96孔板
    PCR联管/管盖
    离心/过滤/浓缩
    离心管
    离心瓶
    针头过滤器
    滤纸
    螺帽管
    移液类
    吸头
    吸头盒
    导电吸头
    移液管
    巴氏吸管
    橡胶/塑料计量/储液容器
    量筒
    三角瓶
    广口瓶
    样品瓶
    安全防护类
    口罩
    手套
    护目镜
    核酸检测
    咽拭子/鼻拭子/保存管
    微孔板/酶标板
  • 试剂
    分子生物学
    缓冲液/稀释液
    DNA转染
    DNA纯化
    PCR相关试剂盒
    质粒
    RNA纯化
    免疫学
    ELISA试剂盒
    流式抗体
    单克隆抗体
    多克隆抗体
    抗体纯化
    蛋白组学
    蛋白纯化
    蛋白质定量
    蛋白电泳
    蛋白标记
    细胞生物学
    培养基
    免疫磁珠
    血清
    细胞因子
    抗生素
    转染试剂
    细胞检测试剂
    细胞染料/标记
  • 仪器
    实验室常用仪器
  • 培养基
产品详情

人结肠癌细胞hct-15(STR鉴定已通过)

品牌: 欣源(BIOSPECIES)
货号: HCT-15
规格: 1*10^6
单位:
单价/元: 1500
产品详情

细胞介绍

该细胞能合成复合胺,肾上腺素。

细胞特性

1) 来源:结直肠腺癌

2) 形态:上皮细胞样,贴壁生长

3) 含量:>1x10^6   细胞数

4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

5)   用途:仅供科研使用。

运输和保存

干冰运输及复苏好存活细胞

(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。

(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

细胞接收后的处理

1)收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。

2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。

3)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。

4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。   收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。

一.培养基及培养冻存条件准备

1) 准备RPMI-1640 培养基;优质胎牛血清,10%;双抗1%。

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

二.细胞处理:

1) 冻存细胞的复苏:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于贴壁细胞传代可以参考以下方法:

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。

3.轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

3)细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

下面T25瓶为例;

1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.

2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。

3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。


广州速研生物科技有限公司
广州市黄埔区科学城掬泉路3号广州国际企业孵化器D614房、A504房
联系电话:020-28906991
联系客服
 
 
 
 
 工作时间
周一至周五 :9:00-18:00